树突状细胞（DC细胞）与T细胞之间的相互作用在肿瘤治疗中扮演着至关重要的角色。研究表明，骨髓来源的DC细胞（BMDCs）能够诱导出CD103+CD8+组织驻留记忆T细胞亚型，从而增强生殖道局部肿瘤的控制效果。此外，半乳糖酸阻断进一步提升了BMDCs诱导抗原特异性CD8+ T细胞增殖的能力。全转录组基因表达分析显示，仿硅酸处理的BMDCs可以诱导与T细胞活化、细胞黏附和细胞间相互作用相关基因的差异表达。

细胞聚类和单细胞亲和性测定结果表明，糖基化减少的BMDC与CD8+ T细胞之间形成了更强的亲和性相互作用。DC细胞在完成抗原呈递后，在激活CD8+ T细胞和靶细胞杀伤过程中，如何发挥协作功能以及调控机制，成为当前研究的热点之一。活化的CD8+ T细胞记忆功能的变化，与其细胞内的乳酸化、棕榈酸化及相关代谢过程密切相关。本期，小E将为大家提供有关DC细胞活化的CD8+ T细胞及评估CD8+ T细胞杀伤功能的解决方案，基于新葡萄8883官网AMG的专业技术。

实验原理简介

DC细胞是已知功能最强的抗原呈递细胞（APC），能够摄取消化外源抗原，并将其装载在MHC分子上，呈递给CD4+和CD8+ T细胞以引发免疫反应。DC细胞和CD8+ T细胞的共培养模拟了体内CD8+ T细胞的激活，是CD8+ T细胞相关研究中不可或缺的模型体系。

实验结果展示

DC细胞的体外培养和促成熟

(A) 流式细胞术检测显示，体外诱导的C57小鼠骨髓细胞经促成熟处理后，成熟DC细胞的MHCII/CD80/CD40/CD86表达显著上升。

CD8+ T细胞的分选及抗原提呈和激活培养

(B) 使用EasySort™MouseCD8+TCellIsolationKit从C57小鼠脾脏分选CD8+ T细胞，流式细胞术分析分选后细胞的纯度。(C) 使用灭活的靶细胞（Raw2647）进行抗原装载DC后，与分选的CD8+ T细胞共培养72小时，检测CD8+ T细胞的增殖。

CD8+ T细胞杀伤靶细胞的凋亡检测

(D) 增殖后的T细胞与靶细胞（Raw2647）按1:10比例共培养24小时，流式细胞术检测靶细胞中Caspase3酶活性的变化。与正常靶细胞组相比，共培养组中Raw2647细胞Caspase3的激活比例显著增至7944%。(E) ELISA检测细胞培养上清中的细胞因子表达，结果显示共培养组中的IFN-γ、IL-2、TNF-α表达均明显增加。

实验方案及操作流程

DC细胞的体外培养和促成熟

取小鼠骨髓细胞，用分化培养基培养6天后，再用成熟培养基培养24小时，获得成熟DC细胞。

CD8+ T细胞的分选和抗原提呈及激活培养

取C57小鼠脾脏细胞，使用EasySort™MouseCD8+TCellIsolationKit进行细胞分选，分析CD8+ T细胞的纯度，然后进行后续的CFSE标记及共培养。

CD8+ T细胞杀伤靶细胞的凋亡检测

通过与靶细胞的共同培养，运用Caspase3流式底物及相关抗体分析CD8+ T细胞对靶细胞的杀伤效果。

更多关于体外模型处理方案、细胞凋亡诱导剂信息和相关关键试剂盒涉及到的实验细节，可以通过与新葡萄8883官网AMG的技术支持团队联系获取了解。

参考文献

相关研究文献和方法可以参考提供的文献列表，以强化研究背景和理论基础。