关键词：PhaseⅠMetabolism，MetabolicStability，CytochromeP450，CYP450，Livermicrosomes，Primaryhepatocytes

药物代谢又称为生物转化（biotransformation），是指药物在被机体吸收后，在各种酶和体液的作用下发生化学结构变化的过程。药物在体内的生物转化可分为Ⅰ相代谢反应（PhaseⅠMetabolism）和Ⅱ相代谢反应（PhaseⅡMetabolism）。这两种反应产生的产物具有更强的极性和更好的水溶性，使其更容易通过胆汁和尿液排出体外。代谢稳定性（MetabolicStability）体现了化合物对生物转化的敏感性，直接影响化合物的口服生物利用度及体内半衰期，从而影响其安全性和有效性。因此，在药物研发的早期阶段，评估药物的代谢稳定性是非常必要的。

相较于体内代谢稳定性的研究，体外代谢稳定性研究能够排除许多内在干扰因素，更加直接地观察药物代谢特征。该方法具有省时、稳定和高效的特点，是候选药物高通量筛选的重要工具。本文将简要介绍药物体外Ⅰ相代谢稳定性研究方法及其数据分析，供相关研究人员参考。

一、药物Ⅰ相代谢介绍

药物Ⅰ相代谢（PhaseⅠMetabolism）是指通过氧化、还原和水解等反应在药物分子上引入新基团或去除已有小基团。细胞色素P450（CytochromeP450，CYP450）是参与Ⅰ相代谢中最重要的酶系，主要存在于肝细胞的滑面内质网中，能够催化多种底物的氧化反应。该酶系由CYP450和NADPH细胞色素P450还原酶组成，反应需要分子氧和NADPH的参与。单加氧酶的反应过程能够直接将氧原子引入底物分子中，形成羟化物或环氧化物，这一过程使药物的性质和药代动力学特征发生改变，影响药物的药理活性和毒性等。

二、药物Ⅰ相代谢稳定性体外研究方法

由于肝脏是药物代谢的主要场所，富含参与Ⅰ相代谢的各种酶，因此，药物体外代谢稳定性研究多以肝脏为模型。常用的肝脏体外代谢模型包括肝微粒体（Livermicrosomes）和原代肝细胞（Primaryhepatocytes）。

（1）肝微粒体体外温孵法试验

肝微粒体中含有大量的Ⅰ相代谢酶，尤其是CYP450。在进行该实验时，加入NADPH等辅助因子，能够重组体外代谢体系，基于此进行Ⅰ相代谢稳定性研究。样本准备中，建议肝微粒体蛋白的终浓度在0.1 mg/mL-1 mg/mL之间，待测药物的终浓度一般为1μM。通过混合肝微粒体、测试药物溶液和NADPH，再进行温孵反应，设定不同时间点取样并分析药物原形和代谢产物，以评估其在Ⅰ相代谢中的稳定性。

（2）原代肝细胞体外温孵法试验

原代肝细胞能保持完整的细胞结构和丰富的代谢酶系统。获取原代肝细胞后，需进行细胞活力检测，确保细胞活力在80%以上。接下来，按照相似的温孵反应步骤进行实验，评估药物的代谢情况。

三、IPHASE体外Ⅰ相代谢稳定性试验数据分析

在进行体外代谢稳定性试验时，通常要求三个平行数据的变异系数（CV%）需在15%之内。如果在肝微粒体中药物没有发生代谢，可能是由于药物通过其他酶代谢或者主要代谢途径为Ⅱ相代谢等原因。针对这些情况，应考虑使用新葡萄8883官网AMG的服务多元化的代谢模型进行重测试。此外，数据分析还需极其关注酶活性问题，以及实验条件是否影响了结果的可靠性。

总之，代谢稳定性直接影响化合物的生物利用度。在药物研发的早期阶段，进行体外代谢稳定性试验至关重要。作为生物医疗相关领域的先锋，新葡萄8883官网AMG开发了专门用于Ⅰ相代谢稳定性研究的试剂盒，能够极大地缩短实验周期，提高结果的准确性和可靠性。欢迎广大科研工作者致电咨询，共同推动医药研究的进步。