### 细胞简介 该细胞系来源于一名1岁男孩的急性单核细胞性白血病外周血。此细胞具备吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力，且细胞膜和胞浆内无免疫球蛋白，显示出C3R和FcR的表达。它能够在佛波酯TPA的诱导下向单核系方向分化，适合作为转染宿主。

### 细胞信息 - **细胞名称**：Thp-1人单核细胞白血病 - **生长特性**：悬浮生长，低密度易聚团，高密度时分散 - **倍增时间**：60-70小时（PubMed=6970727）；26小时（PubMed=25984343）；~35-50小时（DSMZ=ACC-16） - **换液频次**：2~3次/周 - **传代比例**：1:2-1:4（具体情况视实际细胞量决定） - **细胞密度**：在8X10⁶/ml进行传代，不应超过1X10⁶/ml

### 培养基推荐配方 RPMI-1640（中乔新舟货号：ZQ-200）+ 10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500）+ 1%双抗（中乔新舟货号：CSP006）+ β-Mer终浓度：0.05 mM（中乔新舟货号：CSP005，例：500ml添加500μl）。 **β-Mer（巯基乙醇）的作用**：β-巯基乙醇作为抗氧化补充剂，能够减轻氧化应激对THP-1细胞的影响。在细胞密度过大但依然需要维持时，可以适当增加巯基乙醇的比例（不超过标准量的15倍）。

### THP-1细胞复苏 THP-1细胞复苏后需3-5天以恢复状态。由于细胞对密度的依赖性，若复苏时已去除冻存液，建议在复苏后的48小时内避免操作。低密度时细胞可能会形成团块，这是细胞快速增殖的正常现象。

### THP-1细胞的传代 A. THP-1细胞为悬浮细胞，具有低密度依赖性，达到8×10⁵活细胞/mL时需传代，避免超过1×10⁶活细胞/mL。 B. 传代比例通常为1:2-4，可在分瓶后补充培养液，无需离心，t25培养瓶中加鲜培养基至7ml。 C. 推荐通过细胞计数来把控悬浮细胞的密度。 D. 培养一周后可进行一次离心，以去除死细胞。

### THP-1细胞的冻存 A. 冻存液可选用10%DMSO配方（900μl FBS + 100μl DMSO，操作时需小心）。 B. 收集健康状态的细胞于15mL离心管中，调整细胞浓度至200万-300万/mL。 C. 根据情况可放入-80℃保存，最长3个月，尽快转移至液氮中进行长期保藏。

### THP-1培养常见问题 1. **细胞聚团处理**：少量细胞聚团属于正常现象，尤其是在低密度下。高密度时细胞会自然分散。若聚团严重，可通过调整β-巯基乙醇用量、更换血清品牌或增加血清比例（不超过20%）来改善。 2. **细胞贴壁处理**：在培养中少量贴壁细胞是正常的，可通过轻轻吹动收集或丢弃贴壁细胞。若贴壁细胞超过20%，则需检查培养环境及材料。 3. **复苏失败处理**：THP-1细胞的复苏率较低，建议冻存时增加细胞量，复苏后需3-5天以恢复状态，并可通过低速离心去除细胞碎片。细胞处理应温和，避免频繁离心。

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