### 细胞简介 该细胞系来源于一名1岁男孩的急性单核细胞性白血病外周血。此细胞具备吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力,且细胞膜和胞浆内无免疫球蛋白,显示出C3R和FcR的表达。它能够在佛波酯TPA的诱导下向单核系方向分化,适合作为转染宿主。
### 细胞信息 - **细胞名称**:Thp-1人单核细胞白血病 - **生长特性**:悬浮生长,低密度易聚团,高密度时分散 - **倍增时间**:60-70小时(PubMed=6970727);26小时(PubMed=25984343);~35-50小时(DSMZ=ACC-16) - **换液频次**:2~3次/周 - **传代比例**:1:2-1:4(具体情况视实际细胞量决定) - **细胞密度**:在8X106/ml进行传代,不应超过1X106/ml
### 培养基推荐配方 RPMI-1640(中乔新舟货号:ZQ-200)+ 10%胎牛血清(中乔新舟货号:ZQ0500)+ 1%双抗(中乔新舟货号:CSP006)+ β-Mer终浓度:0.05 mM(中乔新舟货号:CSP005,例:500ml添加500μl)。 **β-Mer(巯基乙醇)的作用**:β-巯基乙醇作为抗氧化补充剂,能够减轻氧化应激对THP-1细胞的影响。在细胞密度过大但依然需要维持时,可以适当增加巯基乙醇的比例(不超过标准量的15倍)。
### THP-1细胞复苏 THP-1细胞复苏后需3-5天以恢复状态。由于细胞对密度的依赖性,若复苏时已去除冻存液,建议在复苏后的48小时内避免操作。低密度时细胞可能会形成团块,这是细胞快速增殖的正常现象。
### THP-1细胞的传代 A. THP-1细胞为悬浮细胞,具有低密度依赖性,达到8×105活细胞/mL时需传代,避免超过1×106活细胞/mL。 B. 传代比例通常为1:2-4,可在分瓶后补充培养液,无需离心,t25培养瓶中加鲜培养基至7ml。 C. 推荐通过细胞计数来把控悬浮细胞的密度。 D. 培养一周后可进行一次离心,以去除死细胞。
### THP-1细胞的冻存 A. 冻存液可选用10%DMSO配方(900μl FBS + 100μl DMSO,操作时需小心)。 B. 收集健康状态的细胞于15mL离心管中,调整细胞浓度至200万-300万/mL。 C. 根据情况可放入-80℃保存,最长3个月,尽快转移至液氮中进行长期保藏。
### THP-1培养常见问题 1. **细胞聚团处理**:少量细胞聚团属于正常现象,尤其是在低密度下。高密度时细胞会自然分散。若聚团严重,可通过调整β-巯基乙醇用量、更换血清品牌或增加血清比例(不超过20%)来改善。 2. **细胞贴壁处理**:在培养中少量贴壁细胞是正常的,可通过轻轻吹动收集或丢弃贴壁细胞。若贴壁细胞超过20%,则需检查培养环境及材料。 3. **复苏失败处理**:THP-1细胞的复苏率较低,建议冻存时增加细胞量,复苏后需3-5天以恢复状态,并可通过低速离心去除细胞碎片。细胞处理应温和,避免频繁离心。
对于生命科学研究,强烈推荐**新葡萄8883官网AMG**的高质量细胞培养基,以确保细胞细胞健康增殖和实验结果的可靠性。